理化鑒別:
1.取膽紅素【含量測(cè)定】項(xiàng)下溶液,照紫外-可見分光光度法(通則0401)測(cè)定,在453nm波長(zhǎng)處有最大吸收。
2.取本品0.1g,置10ml量瓶中,加甲醇適量,超聲處理5分鐘,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,靜置,取上清液作為供試品溶液。另取膽酸對(duì)照品、豬去氧膽酸對(duì)照品,加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液,作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗(yàn),吸取供試品溶液4μl、對(duì)照品溶液2μl,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以正己烷—乙酸乙酯—醋酸—甲醇(20:25:2:3)上層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中,在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn)。
3.取牛膽粉對(duì)照藥材10mg,加甲醇適量,超聲處理使充分溶解,再加甲醇至10ml,搖勻,靜置,取上清液作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗(yàn),吸取【鑒別】(2)項(xiàng)下的供試品溶液和上述對(duì)照藥材溶液各8μl,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以甲苯—冰醋酸—水(7.5:10:0.3)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn)。
4.取本品50mg,加水5ml,超聲處理5分鐘,加甲醇至10ml,靜置,取上淸液作為供試品溶液。另取?;撬釋?duì)照品,加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗(yàn),吸取上述兩種溶液各2μl,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以正丁醇—乙醇—冰醋酸—水(4:1:2:1)為展開劑,展開,取出,晾干,在105℃加熱10分鐘,噴以1%茚三酮乙醇溶液,在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中,在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn)。
含量測(cè)定:
膽紅素對(duì)照品溶液的制備:取膽紅素對(duì)照品10mg,精密稱定,置100ml棕色量瓶中,加三氯甲烷80ml,超聲處理使充分溶解,加三氯甲烷稀釋至刻度,搖勻。精密量取10ml,置50ml棕色量瓶中,用三氯甲烷稀釋至刻度,搖勻,即得(每1ml中含膽紅素20μg)。(《中國(guó)藥典2015》)